한국건강관리협회 중앙검사의원

의뢰/관리

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검사의뢰방법
검체채취 및 관리지침

검사 의뢰 종류

1)진단면역, 2)임상화학, 3)진단혈액, 4)분자유전, 5)질량분석, 6)전기영동, 7)면역혈청, 8)미생물, 9)병리검사

검사 의뢰지 기입 요령

의뢰항목에 적합한 메디체크랩 프로그램을 사용하여 필요한 내용을 반드시 기록하여 주십시오.

검사종목 :전산프로그램에 검사항목 등록
진료과 :기관명, 진료과, 담당의사wnd
검체정보 :성명, 성별, 나이, 임신정보(여자), 접수번호 등
검체 :검체종류, 부위(세포,조직), 채취일 및 시간, 의뢰일 등

기관명, 성명, 생년월일, 접수번호 필수

검체 채취 방법

검체 :각 검체는 메디체크랩의 검사항목에 적합하게 채취하십시오.
용기 :용기에 부착되어 있는 라벨에 성명, 연령, 성별, 접수번호를 반드시 기록하십시오.
검체수 :동일한 수검자에서 한가지 이상의 검체를 의뢰하는 경우 라벨에 각각 검체명과 검사명을 적어주십시오.

주의사항 : 모든 환자의 검체는 감염의 위험이 있을 것으로 간주하고 다루어야 합니다.

검체 제출과 수송 방법

검체 제출 및 수송과정에 특별한 주의가 필요한 검체(예 : 냉장 운반, 즉시 운반)는 메디체크랩 ‘검사안내 책자’의 검사항목별 지침 내용을 따라주십시오.
검체는 의뢰담당자를 통하여 검체수송업체 담당직원에게 제출하여 주십시오. 제출된 검체는 즉시 수거되어, 익일에 메디체크랩 운송 및 검사가 이루어집니다.

추가검사 요청

추가검사 요청 시 메디체크랩로 연락하여 가능여부를 꼭 확인하여 주시기 바랍니다.
1일 소요되는 검사인 경우, 오후 5시 이전까지 접수된 검사는 익일 정오까지 보고 완료됩니다.

주의사항

스케줄 검사 종목은 검사안내의 검사항목별 검사일 및 소요일에 따라 검사가 이루어집니다.
검체가 심하게 오염되거나 변성되었으면 검사를 실시할 수 없습니다. 이 경우는 검체를 재채취하도록 요청합니다.
검체량이 부족하면 재검 및 추가 검사가 불가능합니다.
응급을 요하는 경우나 기타 문의사항은 메디체크랩로 문의하시기 바랍니다.

검사결과의 보고

검사결과는 메디체크랩 홈페이지에서 실시간 조회 및 출력이 가능합니다.

채혈 지침
분자유전 검사
혈액진단 검사
잠복결핵 검사
NK세포 활성도검사
미생물 검사
조직·세포병리 검사
의료종사자 보호를 위한 주의사항

채혈 지침

채혈 준비

채혈에대한 정보를 제공하는 표입니다.
채혈 시 필요한 도구	Tourniquet 사용법
장갑 Tourniquet 70% 알코올 솜 Syringes / Butterfly needle / Vacutainer needle Tubes 주사바늘 수거 통 반창고	채혈하고자 하는 부위로부터 8-10cm 윗 부분에 묶습니다. 오래압박 시 울혈을 유발하므로 1분 이상 묶지 않도록 합니다. 너무 강하게 압박하면 동맥혈류까지 막아 채혈관으로 흐르는 혈류가 멈추어 울혈이 생기므로 주의합니다. 같은 부위의 재채혈이 필요한 경우에는 최소한 2분 경과후 해당부위를 안정시키고 사용합니다.

채혈 방법

환자 확인
공복 여부 확인
환자의 팔을 책상 위 (심장위치와 같은)에 올려놓고 천자할 부위 상부에 Tourniquet을 감아주십시오.
알코올 솜으로 채혈부위 소독 후 알코올을 말립니다.(알코올이 마르지 않으면 검체 용혈의 원인이 되므로 주의해 주십시오.)
주사바늘을 15°각도로 피부에 천자합니다.
- 주사기
  - Plunger를 천천히 뒤로 당겨 채혈합니다. 급하게 당기면 용혈을 일으킬 수 있습니다.
  - 진공채혈관 정도만큼 충분한 양을 채혈하십시오.
- 진공채혈관
  - 받침을 고정시키고 채혈관을 밀어 넣습니다. 채혈이 끝나면 조심스럽게 빼주십시오.
  - 연속 채혈 시 Holder로부터 첫 채혈튜브를 제거한 후 두 번째 튜브를 Holder에 밀어 넣으십시오.
  - 채혈관이 꽂혀 있는 동안에는 절대로 혈관에서 바늘을 뽑지 않아야 합니다.
채혈이 시작되면 Tourniquet을 풀어줍니다.
바늘을 제거하고, 채혈부위를 압박해 줍니다.
- 과도한 출혈(5분이상)과 혈청용기의 혈액이 응고되지 않는 경우 의사에게 알려 조치 하여야 합니다.
- 사용된 주사바늘은 반드시 주사바늘 전용 수거통에 버려야합니다.
항응고제와 혈액이 잘 섞이도록 바로 Inverting하여 주십시오.

Inverting

Mixing 1 time

채혈에대한 정보를 제공하는 표입니다.
튜브명	검사	Mixing	첨가제
Sodium Citrate	PT/aPTT, 특수 응고 검사, 응고 인자	4회	3.2% Sodium Citrate
Plain	Blood typing, 약물	5회	Clot activator
SST	생화학, 혈청학	6회	Clot activatior & Acrylic gel
PST	응급 생화학	8회	Lithium heparin & gel
Heparin	혈액 가스	8회	Heparin
EDTA	혈액 검사	8회	Spray-dried K2 EDTA
Glucose	Glucose 검사	8회	Sodium Flouride & Na2 EDTA
NK Vue	NK세포 활성도 검사	10회	NK Cell activator
STANDARD ETB-feron	잠복결핵검사	10회	CFP-10, ESAT-6, TB7.7

채혈 순서

01
NK Cell activator
(1mL)
02
S/C
(2.7mL)
03
Plain
(6mL)
순서상관없음
04
SST
(5mL)
05
Heparin
(10mL)
순서상관없음
06
PST
(4.5mL)
07
EDTA
(3mL)
08
CFP-10, ESAT-6,TB7.7
(각 1mL)
회 →빨 →보

분리 및 보관

혈액이 진공채혈관(SST)벽면의 도포된 Clot activator에 의해 충분히 응고 될 수 있도록 가볍게 mixing한 후 30분에서 1시간 동안 실온에 세워둡니다.
- 혈청이 분리되기 전인 전혈상태에서 냉장보관(4℃)하게 되면 1시간에 약 0.2mmol/L 정도 혈청 K가 증가하므로 혈청 분리 전까지는 반드시 실온(15-25℃)에 보관하셔야 합니다.
응고된 혈액상태에서 2시간이내에 원심분리기를 이용하여 1300-2000RCF(g)에서 10분간 혈청을 분리합니다.
- 원심 분리기가 준비되지 않았을 경우에는 30분에서 1시간 동안 실온에서 응고시킨 후 상단에 분리된 혈청을 신속하게 분리하여 주십시오.
분리 후에는 냉장 보관하여 의뢰해 주십시오.

분자유전 검사

Apo E 검사의 검체는 EDTA tube에 채취된 것을 사용하며, 진공 tube에 혈액 2mL를 채혈한 후 즉시 tube를 아래·위로 8-10회 정도 기울여
EDTA와 혈액이 잘 섞이도록 해야 부분 응고가 방지됩니다.
HPV 관련 검사는 검사항목에 해당되는 전용 용기를 반드시 사용합니다.
Hepatitis Virus 관련 검사는 항응고제가 없는 SST tube의 사용을 원칙으로 합니다.
HCV RNA 검사의 경우 RNA가 매우 빨리 분해되므로 혈액을 채취하여 당일 의뢰하여 주십시오.
RNA Virus를 의뢰한 검체 중 용혈된 검체는 검사결과가 불안정하니 주의하십시오.
유전질환이나 기타 신중을 요하는 검사는 반드시 임상소견 및 의뢰목적을 유전자 검사의뢰서에 기록하여 주시고, 유전자 검사동의서와 함께 보내주십시오.
검체 보관 및 이송은 냉장 상태로 합니다.

혈액진단 검사

채혈 후 3시간 이내에 말초혈액도말 슬라이드를 제작하는 것이 좋습니다.
슬라이드 오른쪽 진한 부위에 연필로 수검자 정보(기관명, 수검자명, 성별, 나이 등)를 기재합니다.
혈액도말 슬라이드를 충분히 건조하여 슬라이드 케이스에 넣어 CBC 검체와 함께 보내주십시오.

슬라이드 제작 방법

깨끗한 유리슬라이드의 오른쪽 끝에서 약 1cm 떨어진 부위에 혈액 한 방울을 떨어뜨립니다.
또 다른 슬라이드를 혈액 방울 위에 30-45°로 접촉시킵니다.
혈액이 미는 슬라이드 끝을 따라 골고루 퍼지면 곧바로 일정한 속도와 각도로 도말합니다.
도말의 길이는 약 3-4cm가 적당하며, 신속히 건조하여야 합니다. (건조가 늦어지면 세포형태의 변형이 초래됩니다.)

자주 발생하는 부적합한 말초혈액도말 슬라이드

혈육안확인
- 슬라이드와 맞닿은 스프레더 슬라이드(spreader slide)의 면이 부서지거나 거칠 경우
- 도말 속도가 불규칙적일 경우
- 스프레더 슬라이드 면에 혈액이 충분히 펴지지 않을 경우
- 슬라이드에 떨어뜨린 혈액의 양이 부족할 경우
- 혈액이 슬라이드의 폭에 맞춰 퍼지지 않은 경우
- 슬라이드가 깨끗하지않거나 기름질 경우 (혈액 내 지질성분이 많을 경우)
- 슬라이드와 스프레더 슬라이드 간의 압력이 일정하지 않을 경우
- 혈액을 떨어뜨린 후 늦게 도말할 경우
부적합 슬라이드의 혈구 형태
- 건조 지연 또는 슬라이드 표면의 습기에 의한 artifact
  - 문제점 : 적혈구 형태 관찰 불가
  - 해결방법 : 도말 후 즉시 건조하고 슬라이드 표면이 습기에 노출되지 않도록 합니다.
- 포르말린 가스에 의한 artifact
  - 문제점 : Wright 염색 후 슬라이드가 뿌옇고 파랗게 변형됨
  - 해결방법 : 슬라이드를 비닐봉지 안에 넣어 노출을 최소화하고 조직검체와 분리하여 보관합니다.

잠복결핵 검사

채혈 튜브는 2-25℃의 온도에 보관하여 주시고 채혈 전에는 15-25℃에 꺼내어 상온화 시켜 주십시오.
채혈 순서를 반드시 지켜주시기 바랍니다.(바뀔 시 오염으로 인한 부정확한 결과를 초래합니다.)
- Nil(Gray) → TB Ag(Red) → Mitogen(Purple)
채혈양이 부족할 경우 세포량이 확보되지 않아 결과에 변동이 있을 수 있으므로 채혈양을 반드시 준수해 주시 기 바랍니다.
최적의 반응을 위해 차가운 상태에서 채혈을 금합니다.
채혈 즉시 기포가 생기지 않게 10회 shaking 한 후 15-25℃에 보관하여 주십시오.

Incubation

채혈 후 16시간 안에 incubation 시작하여주십시오.
incubator에 들어가기 전까지 채혈된 튜브는 반드시 15-25℃로 유지하여 주십시오.
배양온도 : 37±1℃ (튜브를 세워서 배양해야 합니다.)
배양시간 : 16-24시간
배양 후 원심분리를 바로 하지 못할 시 2-25℃에서 최대 1일간 보관 가능합니다.
원심 분리한 plasma의 경우 2-8℃에서 7일간 보관 가능합니다.
배양하기 전 전혈 검체의 냉장 혹은 냉동 보관을 금합니다.
배양 후 15분 동안 RCF 2200~2300g 조건에서 원심분리 하십시오.

NK세포 활성도검사

냉장보관한 NK전용튜브는 꺼낸 즉시 사용합니다.
채혈튜브의 검은색 선 표시되어있는 곳까지 혈액 1mL를 채혈합니다.
여러종류의 튜브를 함께 사용하는 경우, NK전용튜브를 가장 먼저 채혈합니다.
Syringe로 채혈해서 분주한 경우, 반드시 NK전용튜브 뚜껑을 열고 정량 분주합니다.
채혈 후 10회 inverting합니다. (롤러사용을 금합니다.)

Incubation

채혈 후 즉시 배양을 시작하여 주십시오. 채혈 후 30분까지는 활성도가 유지되나, 이후 시간이 경과됨에 따라 수치에 영향을 줄 수 있으며, 최대 1시간 이내에는 배양 시작을 권고합니다.
배양온도 : 37±1℃ (튜브를 세워서 배양해야 합니다.)
배양시간 : 20-24시간
배양이 끝난 후 상층액과 혈구가 혼합되지 않도록 주의하여 상층액을 따서 plain 튜브에 옮깁니다.
상층액 plasma는 2-8℃에서 의뢰하여 주십시오.

미생물 검사

장내세균 검사

면봉에 이상이 없는지 확인하고 주위에 오염되지 않게 조심해서 꺼내 주십시오.
한 손으로 항문 부위를 노출시키고 다른 한 손으로 면봉을 넣어주십시오.
약2.5~4cm정도 삽입하고 직장 벽을 향해 돌리면서 천천히 빼주십시오.
면봉에 분변이 충분히 묻어 있는지 확인 후 면봉을 수송배지에 넣은 후, 뚜껑이 열리지 않게 잘 닫아주십시오.
추가적으로 콜레라검사가 있는 경우 반드시 면봉 2개 모두 채취해 주십시오.
검체보관 및 이송은 냉장상태로 해주십시오.

감염관리 배양검사

내시경 scope의 Air/water 및 suction cylinder를 멸균증류수를 묻힌 수송배지로 2~3회 swab하여 검체를 수집해 주십시오.

물배양 검사

멸균용기(conical tube)에 무균적으로 채취하여 5cc이상 담아 주십시오.

조직 · 세포병리 검사

조직 병리검체 취급방법

검체의 고정
- 고정액은 10%중성 포르말린으로 조직의 10-20배 정도의 양을 사용하여 조직이 완전히 담기게 하고, 실온에서 고정합니다.
- 포르말린을 사용하는 목적은 검체 보존성이 뛰어나며, 조직의 자가융해(autolysis)와 건조를 방지하기 위한 것입니다.
- 포르말린 이외의 생리식염수나 알코올 등의 기타용액은 절대 사용해서는 안됩니다.
- 고정액이 없을 경우, 생리식염수에 적신 거즈로 조직을 싸서 냉장 보관합니다. 그리고 최대한 빨리 고정액에 옮겨 담아야 합니다.
- 채취부위가 다른 곳이라면 다른 용기에 담아 고정하십시오.
- 작은 생검 조직은 여과지에 올려 조직의 유무와 조직의 개수를 확인합니다.
- 조직용기는 입구가 넓어야 하고, 고정액이 새지 않도록 밀봉해야 합니다.
- 수검자간의 검체가 바뀌지 않도록 주의합니다.
검사의뢰서 작성
- 환자의 이름, 성별, 생년월일, 차트번호, 의뢰기관명을 확인합니다.
- 채취부위, 채취방법, 임상소견을 영문으로 정확히 기록합니다.
  예시) Stomach,antrum,biopsy; Erosive lesion,R/O EGC Colon, ascending, snare polypectomy; Polyp, R/O Polypoid carcinoma
- GI tract(gastrointestinal tract)인 경우, biopsy, forceps polypectomy에서는 resection margin에 대한 평가가 불가능하므로 병리진단지에 언급하지 않습니다.
- snare polypectomy, endoscopic mucosal resection인 경우 resection margin을 평가하여 병리 진단지에 기록하고 있습니다.
- 기타 시술방법에서는 resection margin의 평가가 필요한 경우 의뢰지에 별도로 표기해 주시기 바랍니다.
- 전염성 질환, 과거병력 및 특이사항을 기록합니다.
- 의뢰서에 육안상 확인된 조직 개수를 기록합니다.
- 응급일 경우 검체용기와 의뢰서에 응급사유와 “응급”이라고 알아보기 쉽게 표기합니다.

세포병리 검사

세포검사용 검체
- 검체채취 하루 전에 질 내 치료나 피임약제 등의 사용을 금합니다. 검체 채취 전 외상치료나 biopsy등을 행한 경우 혈액이 슬라이드에 도말되어 판독이 어려워지므로 피합니다.
- 검체는 cytobrush를 사용하여 충분한 양을 채취해야 합니다.
- 검체는 채취한 후 slide에 얇고 균일하게 도말하고, 세포변성을 방지하기 위하여 95% ethylalcohol 또는 cytospray 등 피복 고정체(coating fixation)으로 고정합니다.
- 검체 용기에 검사자의 성명, 번호, 의뢰처 등의 정보를 반드시 기재합니다.
- 검체 채취 후 검체 용기의 마개를 단단히 막아 검체 유실을 방지합니다.
일반 자궁질도말검사용 검체
- 일반 자궁질도말검사 고정
  - 도말 된 슬라이드는 즉시 95%에틸알코올에 담구어 최소 30분 이상 고정합니다. (메틸알콜 사용금지)
  - 충분히 고정된 슬라이드는 완전히 건조시킨 후 수송용 PAP통에 넣습니다.(도말된 슬라이드의 경우 습기와 포르말린 성분에 의해 세포 변성을 일으킬 수 있습니다.)
  - 수송용 PAP통 안에 제습제를 넣어 남아 있는 습기를 제거할 것을 권합니다.
  - 매일 업무종료 후 사용한 95%에틸알코올은 폐기하고 고정용 용기는 깨끗이 씻어 건조시킵니다.
  - 검사시작 전 건조된 고정용 용기에 신선한 95%에틸알코올을 슬라이드가 충분히 잠길 만큼 부어서 사용합니다.
  - 검사 중에 95%에틸알코올이 휘발되지 않도록 고정용 용기의 뚜껑을 닫고 사용합니다.
  - 수송용 PAP통은 지퍼팩에 넣어 밀봉한 뒤 흔들리지 않도록 행낭에 고정시켜 의뢰합니다.
  - 토요근무 및 담당자 변경 시 위의 사항을 반드시 인계하여 주십시오.
액상세포검사용 검체
- 액상 자궁경부 검사
  - 윤활제를 묻히지 않고 자궁경을 사용해 자궁경부의 세포를 솔로 채취합니다.
  - 솔을 보존액 용기에 넣어 2-3회 충분히 흔들어 준 후 사용한 솔은 폐기합니다.
일반 자궁질도말검사 고정
고정양호
고정불량
액상검사 검체 처리 방법
- 부인과 검체
  - 각 브러쉬로 채취한 검체를 PreservCyt 보존액병에 넣고 바닥면으로 솔이 휘어져 서로 벌어지도록 10회 이상 밀면서 충분히 회전시켜 검체를 모두 씻어낸 후 브러쉬는 버려주십시오.
    (단, 삼각 브러쉬의 솔부분을 용기안에 넣지 않습니다.).
- 소변(Urine) 및 객담 (Sputum)
  - 액상 수송용 용기에 신선한 검체 50ml를 넣습니다.
- 세침흡인물 (FNA)
  - 채취한 검체를 액상 수송용 용기에 직접 넣습니다.
Aspriation 후 syringe needle을 분리 한 후 튜브 안에 들어있는 보존액(CytoLyt®solution)을 syringe 안으로 빨아 들인 후 다시 튜브 안으로 넣습니다.
Needle을 syringe에 다시 연결한 후 보존액 용기벽에 밀착하여 부드럽게 검체를 넣습니다. 보존용액을 다시 빨아 들인 후 넣는 과정을 반복 실시합니다.

의료종사자 보호를 위한 주의사항

날카로운 물체를 다룰 때에는 다치지 않도록 특히 조심하여야 하며, 폐기 할 때에는 튼튼한 용기에 버려 다른 사람이 감염되지 않게 하여야 합니다.
주사바늘을 구부리거나, 꺾거나, 다시 마개를 끼우는 등의 조작을 해서는 안되며, 사용 후에는 반드시 주사 바늘통에 넣어야 합니다.
모든 검체는 HIV, B형 또는 C형간염바이러스 등 혈액으로 전파되는 병원체를 갖고 있는 것으로 간주하여 조심성 있게 취급하여야 하며
검체가 외부로 새지 않도록 뚜껑이 꼭 맞는 용기를 사용합니다.
HIV 검사를 의뢰할 때 양성으로 판정되었거나 의심되는 검체는 수거, 접수 시 파손 및 누출되지 않도록 밀봉하여 포장합니다.

검체 취급시 주의사항

찔렸을 경우	즉시 충분한 양의 피를 짜내고, 알코올이나 베타딘 등의 소독제로 충분히 닦아내야 합니다. 사용한 바늘에 찔렸을 때에는 환자의 감염질환 유무를 확인하고 환자의 감염상태에 따라 적절한 조치를 취합니다.
묻었을 경우	검체가 피부에 묻거나 튄 경우에는 흐르는 물과 비누로 충분히 씻어냅니다. 검체를 취급할 때는 라텍스 장갑이나 비닐장갑을 사전에 착용해야 하며 오염이 되었을 때마다 장갑을 바꾸고 손을 씻어야합니다.
엎질렀을 경우	혈액이나 체액을 엎질렀을 경우 마스크, 글러브를 착용하고 엎질러진 물질 위에 종이타올(흡수포)을 덮고 10배 희석 표백제를 뿌려 남아있는 혈액을 닦아 낸 후 비닐팩에 버려야 합니다. 이를 한번 더 반복한 후 사용한 마스크, 장갑은 비닐팩에 넣어 의료 폐기물통에 버리고, 손을 씻어야 합니다.
눈에 들어갔을 경우	착용한 콘텍트렌즈가 있는 경우 제거해야 합니다. 즉시 다량의 흐르는 물로 15분 이상 씻어내고 의사의 진료를 받아야 합니다.
상처가있는 경우	손에 상처가 있을 경우 맨손으로 검체를 다뤄서는 안되며, 1회용 반창고와 장갑 착용 등의 적절한 보호조치가 이루어져야 합니다. 피부염이나 상처가 있는 경우 검체를 취급하지 않아야 합니다.

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